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Régulation transcriptionnelle de G6PT : un rôle métabolique dans la cancérogenèse des cellules tumorales cérébrales?
Amélie Vézina (UQAM - Université du Québec à Montréal), Borhane ANNABI
Le transporteur microsomal de G-6-P est fortement exprimé dans les glioblastomes, des tumeurs cérébrales hautement agressives. La modulation de l’expression de G6PT affecte la survie des cellules cancéreuses. Le rôle de G6PT dans les processus d’adaptation métabolique liés à la cancérogénèse des glioblastomes et les facteurs intracellulaires responsables de sa régulation transcriptionnelle demeurent peu documentés. Nous émettons l’hypothèse que G6PT est un acteur central associé au développement tumoral et que toute intervention pharmacologique de son expression affectera la survie des cellules cancéreuses cérébrales. Lorsque les cellules U87 sont stimulées par le TNFα, le PMA ou la ConA, on observe l’augmentation de l’expression de biomarqueurs inflammatoires (COX-2) et invasifs (MT1-MMP) menant à la répression génique de G6PT et à la diminution de l’activité luciférase régulée par le promoteur de G6PT. Ces changements d’expression modulent également la survie des cellules U87. Des inhibiteurs pharmacologiques (CP, AKBA, LY, PP2) renversent l’expression génique de G6PT affectée par le TNFα, le PMA ou la ConA montrant un rôle des facteurs IKK, JAK3 et PI3K. Des mutants de délétions progressives du promoteur de G6PT ont permis d’identifier une séquence importante dans la régulation de sa transcription. En conclusion, nos résultats montrent qu’un ciblage pharmacologique de G6PT aurait un impact sur la cancérogénèse liée à l’adaptation métabolique des glioblastomes.
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Peut-on utiliser les matrices tissulaires pour évaluer l’amplification du gène HER2 dans les spécimens de carcinome mammaire?
Daniela Furrer Soliz
(Université Laval), Simon JACOB
, Chantal CARON
, François SANSCHAGRIN
, Louise PROVENCHER
,
Caroline Diorio (Université Laval)
L’amplification du gène qui code pour le récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2) et la surexpression de ce récepteur sont associées à un mauvais pronostic dans le cancer du sein. Depuis l'introduction thérapeutique d’un anticorps dirigé contre HER2 (trastuzumab), l’évaluation fiable du statut de ce récepteur est devenue essentielle. Les lignes directrices du Collège des pathologistes américains recommandent, entre autres, les techniques d’hybridation in situ (ISH) pour l’évaluation de l’amplification du gène HER2 dans les carcinomes mammaires. Étant donné que ces tests sont associés à des coûts très élevés, il est donc très important de développer une méthode plus économique pour la détermination du statut HER2. Dans cette étude, nous avons examiné la concordance du statut d’amplification d’HER2 sur coupe histologique (un tissu par lame, la méthode de référence) et sur matrice tissulaire (64 tissus par lame, la nouvelle méthode) dans une cohorte de 521 tissus de cancer du sein. Nous avons observé une concordance globale de 99,8% entre les résultats obtenus par coupe histologique et par matrice tissulaire. La sensibilité de cette nouvelle méthode était de 98,4% et la spécificité était de 100%. L’utilisation de matrices tissulaires représente une façon économique et fiable d’examiner le statut d’amplification d’HER2, car cette méthode permet d’évaluer le statut HER2 dans plusieurs tumeurs simultanément.
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Exploration des disparités dans le dépistage du cancer du sein et du col de l’utérus : l’impact de l’accès aux soins de santé
En 2013, environ 91 400 Canadiennes développeront un cancer, et la majorité sera diagnostiquée du cancer du sein. Un dépistage efficace est donc important pour déceler les lésions précancéreuses et les cancers, et pour réduire l’incidence du cancer et le taux de mortalité. Pourtant, plusieurs disparités dans l’accès au dépistage du cancer du sein et du col de l’utérus ont été documentées chez diverses populations. Le programme de recherche H-CARDD a démontré qu’en Ontario, la proportion de femmes avec une déficience intellectuelle (DI) n’ayant pas reçu de dépistage pour le cancer du col de l’utérus est presque le double de celle des femmes sans DI et 1,5 fois plus élevé pour les mammographies. Une recension systématique est utilisée pour contextualiser les disparités retrouvées entre les femmes avec et sans DI vivant en Ontario. Nous explorons l’utilisation des soins prodigués aux femmes qui ont reçu un dépistage en comparaison à celles qui n’ont pas reçu de dépistage. Nous commentons sur la force de l’association entre les variables clés identifiées dans l’utilisation de soins de santé et les disparités dans le dépistage du cancer du sein et du col de l’utérus. Une meilleure compréhension des facteurs influençant l’accès au dépistage du cancer du sein et du col de l’utérus soutiendra l’amélioration des programmes de santé publique et la formation des professionnels de la santé à répondre aux besoins de groupes vulnérables.
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La déubiquitinase BAP1 forme un complexe multiprotéique avec le facteur de transcription Yin Yang-1 et le régulateur transcriptionnel Host Cell Factor-1
Nicholas Iannantuono (UdeM - Université de Montréal), Helen YU , Nazar MASHTALIR , Salima DAOU , Ian HAMMOND-MARTEL , Eric MILOT , El Bachir AFFAR
Le suppresseur de tumeur BAP1 est une enzyme avec une activité déubiquitinase (DUB) qui est impliquée dans la régulation de la proliferation cellulaire, mais les mécanismes moléculaires contrôlant sa fonction demeurent peu définis. Nous avons trouvé que BAP1 forme un complexe multi-protéique contenant plusieurs facteurs de transcription et cofacteurs incluant HCF-1 et YY1. À l’aide de son motif hélice-hélice, BAP1 interagit directement avec les doigts de zinc de YY1. De plus, HCF-1 interagit avec le domaine central de YY1 qui englobe un domaine riche en glycines et lysines qui est nécessaire à la formation du complexe tertiaire avec YY1 et BAP1. Nous avons révélé que l’activité transcriptionnelle de BAP1 envers des gènes impliqués dans plusieurs processus cellulaire est dépendante de son activité catalytique. Enfin, nous avons démontré que BAP1 est recruté aux promoteurs de gènes cibles par l’intermédiaire de YY1. Nos découvertes (i) établissent un lien direct entre BAP1 et le control transcriptionnel de gènes qui régulent la croissance et la prolifération cellulaire et (ii) suggèrent à la possibilité qu’il existe un nouveau mécanisme de régulation de la transcription impliquant l’ubiquitination et la déubiquitination.
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L’inflammation et les facteurs de risque de cancer du sein
Mirette Hanna (1Unité de recherche en santé des populations du Centre de recherche du CHU de Québec), Mirette HANNA , Isabelle DUMAS , Michèle ORAIN , Simon JACOB , Bernard TÊTU , Caroline DIORIO
L’inflammation chronique joue un rôle dans la carcinogenèse mammaire. Nous avons examiné l’association entre l’expression des marqueurs pro- [l’interleukine-6 (IL-6), le facteur de nécrose tumorale-α (TNF-α) et la protéine réactive-C (CRP)] et anti-inflammatoires [le facteur de croissance transformant-β (TGF-β)] dans l’épithélium normal et deux facteurs de risque de cancer du sein (la densité mammaire et l’involution lobulaire).
Des matrices tissulaires (TMA) ont été construites à partir de tissu normal obtenu des blocs de mastectomies de 164 femmes âgées de 30 à 69 ans atteintes d’un cancer du sein. L’expression des marqueurs inflammatoires a été évaluée par immunohistochimie dans l’épithélium contenu dans 6 carottes présentes sur des sections de TMA. La densité mammaire a été évaluée par une méthode assistée par ordinateur. L’involution lobulaire a été évaluée dans le tissu normal contenu sur des coupes complètes des mêmes spécimens colorés à l’hématoxyline-éosine.
L’expression d’IL-6 et de TGF-β était associée respectivement à une densité mammaire plus importante (IL-6) ou moins importante (TGF-β) après ajustement pour l’âge et le tour de taille (p<0.05). L’expression des trois marqueurs pro-inflammatoires était associée à une plus faible involution lobulaire après ajustement pour l’âge (p<0.05). L’expression des marqueurs inflammatoires dans l’épithélium normal semble affecter les facteurs de risque de cancer du sein et par conséquent le risque de cancer du sein
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Nouvelle fonction de l’O-GlcNAcylation dans les cancers hématologiques
Jessica Gagnon (UdeM - Université de Montréal), Haider H. DAR , Salima DAOU , Nadine SEN , Ian HAMMOND-MARTEL , El Bachir AFFAR
L’O-GlcNacylation, catalysée par l’enzyme O-linked- β-N-glucosamine transférase (OGT), est une modification post-traductionnelle qui réfère à l’addition covalente d’un groupe O-linked β-N-glucosamine (O-GlcNAc) sur les résidues sérine/thréonine des protéines. Cette modification est impliquée dans plusieurs processus biologiques tels que la transcription et la progression du cycle cellulaire. Des défauts de l’O-GlcNAcylation ont été associés à plusieurs pathologies humaines dont le cancer. En purifiant le complexe nucléaire d’OGT, nous avons identifié son association au suppresseur de tumeur TET2 (Ten-eleven-translocation protein 2), une ADN hydroxylase qui catalyse la conversion du 5-méthylcytosine en 5-hydroxyméthylcytosine. De manière importante, TET2 a été démontrée comme étant considérablement mutées dans diverses leucémies. Cependant, les mécanismes moléculaires associés à la fonction de TET2 sont très peu connus. Nous avons confirmé l’interaction entre OGT et TET2 et nous avons démontré que TET2 est O-GlcNAcylée suggérant un rôle important dans la régulation de sa fonction. Nous avons aussi observé qu’OGT exerce un autre effet sur TET2, en inhibant son activité catalytique indépendamment de l’O-GlcNAcylation, suggérant un mode de régulation complexe de TET2 par OGT. Ces travaux permettront d’approfondir d’avantages la fonction qu’OGT exerce sur TET2 et aidera à comprendre comment la dérégulation du 5hmC contribue au développement de cancers hématopoïétiques.
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Les protéines ASXL1 et ASXL2 exercent des activités transcriptionnelles opposées coordonnant l’activité du suppresseur de tumeur BAP1 via la déubiquitination de l’histone H2A
Haithem Barbour (UdeM - Université de Montréal), Salima DAOU , Ian HAMMOND-MARTEL , Lionel MAVOUNGOU , Helen PAK , Nadine SEN , Helen YU , Jessica GAGNON , Haider DAR , Sarah BEN HAMMOU , Eric MILOT , El Bachir AFFAR
L’ubiquitination est une modification post-traductionnelle, impliquée dans la régulation de la transcription des gènes, reversée par l’action des déubiquitinases (DUBs). Le suppresseur de tumeur BAP1est une déubiquitinase souvent mutée dans plusieurs types de cancer. On a reporté précédemment que BAP1 fait partie d’un complexe multi-protéiques incluant des facteurs transcriptionnels. L’homologue de BAP1 chez la drosophile, Calypso, est associé à la protéine polycomb ASX formant le complexe de répression transcriptionnelle, PR-DUB qui catalyse la déubiquitination de l’histone H2A. On s’intéresse à caractériser la fonction biologique de l’association de BAP1 avec deux protéines polycombes, ASXL1 et ASXL2 deux orthologues de ASX. Ici on montre que BAP1 forme deux complexes distincts de remodelage de la chromatine en s’associant avec ASXL1 ou ASXL2 permettent respectivement la répression ou l’activation de l’expression des gènes cibles en déubiquitinant l’histone H2A. On a également identifié une mutation de cancer au niveau de BAP1 qui le rend incapable de lier ASXL1 et ASXL2 et d’agir comme suppresseur de tumeur. Nos résultats démontrent un lien étroit entre la fonction de BAP1 et la régulation de l’expression des gènes au cours du control de la prolifération cellulaire. De plus, notre modèle de travail révèle un nouveau mécanisme d’action de BAP1 en tant que gène suppresseur de tumeur en liant son activité de déubiquitination de H2A et son association avec ASXL1 et ASXL2.
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