102 - Cancer

Les centrosomes sont bien reconnus en tant que centres organisateurs du fuseau mitotique mais il a récemment été démontré qu’ils régulent aussi l’entrée en mitose. Ils recrutement les régulateurs clefs du point de contrôle de la transition G2/M et participent à la réponse aux dommages à l’ADN. De plus, l’amplification du nombre de centrosomes constitue une réponse aux dommages à l’ADN. L’amplification des centrosomes conduit à des mitoses multipolaires au cours desquelles les cellules endommagées meurent par catastrophe mitotique. Nous avons montré au laboratoire qu’une sous-population de CHK2, kinase centrale dans la régulation de la réponse aux dommages à l’ADN, est localisée aux centrosomes où son rôle demeure inconnu. Nos objectifs sont, pour le cycle cellulaire normal et en réponse aux dommages à l’ADN; 1) déterminer le rôle de CHK2 centrosomal dans la régulation de l’entrée en mitose et 2) explorer le rôle de CHK2 dans la régulation de l’amplification centrosomale. Nous avons, pour ce faire, mis au point un modèle de lignées cellulaires inductibles et montrons que notre modèle cellulaire est approprié pour l’étude de la fonction de la sous-population de CHK2 localisée aux centrosomes. Nos données préliminaires suggèrent que cette sous-population centrosomale de CHK2 joue un rôle dans l’entrée en mitose, qu’elle module la stabilité du point de contrôle à la transition G2/M en réponse à des lésions génotoxiques et qu’elle promeut l’amplification centrosomale.

L’ubiquitination est une modification post-traductionnelle essentielle à la régulation de nombreux processus physiologiques incluant l’expression des gènes. L’inactivation ou la suractivation anormale causée par des mutations survenant dans les gènes du système d’ubiquitination est associée à des maladies humaines variées telles les cancers. L’ubiquitination de l’histone H2A (H2Aub) est extrêmement importante pour le remodelage de la chromatine et est nécessaire pour l’expression des gènes. Cette modification est réversible et hautement contrôlée par des protéines nommées deubiquitinases. Des études récentes ont identifié la protéine USP16 comme étant une deubiquitinase de H2A. Cependant, son mécanisme n’est pas encore élucidé. La caractérisation des mécanismes biochimiques et fonctionnels de la deubiquitinase USP16 est fondamentale pour notre compréhension des processus de remodelage de la chromatine et la progression du cycle cellulaire. En utilisant des modèles de lignées cellulaires, nous allons investiguer les médiateurs de signalisation régulant USP16. L’utilisation des techniques de purification par affinité nous permettrait d’identifier et de caractériser les différents partenaires interagissant avec USP16, ainsi que leur impact sur l’ubiquitination de H2A et la prolifération cellulaire.

Afin de mieux comprendre l’évolution du cancer épithélial de l’ovaire (CEO), nous voulons identifier des gènes responsables de l’initiation et de la progression de la maladie. Précédemment, des lignées cellulaires dérivées de tumeurs solides ou d’ascites ont été élaborées après le diagnostique et au moment de la rechute suite au traitement de trois patientes. Ensuite, le séquençage de l’ARN de ces lignées par la technologie de séquençage de nouvelle génération (TSNG) nous a permis d’identifier des mutations ponctuelles qui pourraient révéler des gènes clés dérégulés dans le CEO.

L’analyse des résultats de TSNG nous a permis de sélectionner des gènes mutés dans nos lignées et qui pourraient être impliqués dans l’initiation, la progression et/ou la chimiorésistance du CEO. Étant donné que la TSNG est une technique à taux de fiabilité limité, nous avons validé ces mutations par séquençage Sanger.

Par TSNG, nous avons sélectionné PLEC, SCRIB et NCOR2, SEMA6C, ITGAE, GLCE et IKBKB comme gènes ayant une relation fonctionnelle avec le cancer et présentant des mutations dans nos lignées. Par séquençage Sanger, seules les mutations de PLEC, SCRIB et SEMA6C ont été validées.

Des études sont en cours pour évaluer le niveau d’expression protéique de ces gènes sur des microétalages de tissus séreux afin de le corréler avec la survie des patientes et leur réponse à la chimiothérapie.

La migration cellulaire collective joue un rôle important lors du développement d’un organisme ou de différentes pathologies. Les cellules de bordure de la chambre d’œuf de Drosophile est un model puissant pour étudier ce type de migration. Récemment, un cycle d’endocytose impliquant les petites GTPases Rab5 and Rab11 a été démontré comme jouant un rôle majeur dans la restriction de l’activité des récepteurs tyrosine kinase (RTKs) au front de migration des cellules de bordure. Par contre, la régulation de ces protéines Rabs in vivo est peu caractérisée. Le criblage des protéines activatrices de GTPases (GAPs) pour les Rabs a démontré deux nouveaux régulateurs de la migration collective : RN-tre et l’ortholog de Drosophile EVI5 et EVI5l (dEVI5). Bien que RN-tre est connue comme agissant sur Rab5, la cible de EVI5 est controversée. Nous démontrons dans cette étude que dEVI5 est une GAP pour Rab11 in vivo et que la perte ou le gain de fonction de dEVI5 bloque la migration cellulaire en perturbant la polarisation de l’activité des RTKs.

La voie de signalisation Notch joue un rôle clé dans plusieurs processus développementaux. Par conséquent elle est impliquée dans divers maladies et cancers. La signalisation Notch requiert l’interaction entre le récepteur Notch et son ligand Delta exprimé à la surface d’une cellule adjacente. Différents processus régulent la voie Notch, y compris la modulation de l’activité du ligand Delta. Ce dernier doit être ubiquitiné, endocyté, et dans certains types cellulaires, recyclé à la membrane plasmique pour activer Notch. Delta serait modifié lors de ce trafic endosomal, mais la nature de cette modification est inconnue. Le but de mon projet est d’identifier les mécanismes moléculaires régulant l’activité de Delta. Pour cela, nous avons effectué un criblage shARN pan-génomique utilisant un essai de signalisation Notch in vitro. Dans cet essai, nous avons utilisé la lignée stable de souris OP9-DL1 comme cellule émettrice du signal, et les cellules HeLa comme cellules-cibles. L’activité de Notch dans ces cellules a été suivie grâce à un rapporteur luciférase. Nous allons ensuite effectuer des cribles secondaires pour valider les régulateurs potentiels de Delta dans des tissus physiologiquement réceptifs à Notch. En conclusion, ce projet constitue une opportunité unique d’identifier de nouveaux régulateurs de la signalisation Notch, avec une application potentielle dans le domaine clinique afin de développer de nouvelles thérapies pour les cancers impliquant Notch.

Le neuroblastome (NB) est une tumeur fréquente de l’enfant. Sa chimiorésistance entraîne souvent une évolution défavorable. Il a été mis en évidence que l’autophagie, un processus d’autodégradation régulant l’homéostasie cellulaire, entraînait une chimiorésistance dans divers types de cancers. Dans le NB, nos études préliminaires ont démontré que l’autophagie est augmentée suite à un traitement de chimiothérapie. L’objectif de cette étude est de démontrer la contribution de l’autophagie dans la chimiorésistance du NB.

Afin de bloquer l’autophagie, la lignée cellulaire N91-IGR a été transduite avec un shRNA ciblant Atg5 (une protéine indispensable à l’autophagie). L’efficacité de la transduction a été vérifiée par Western blot. Après traitement avec de la vincristine, cisplatine et doxorobicine, des tests de prolifération cellulaire MTT et de mesure d’autophagie MDC ont été réalisés. Les cellules transduites ont présenté une sensibilité significativement plus élevée à la vincristine, suivie de cisplatine et doxorobicine par rapport à celles non transduites. Le test MDC révèle une diminution des taux d’autophagie des cellules transduites contre Atg5 et traitées par les chimiothérapies.

L’un des mécanismes que les cellules de NB utilisent pour résister à la chimiothérapie est l’autophagie. Par conséquent, l’inhibition de l’autophagie en combinaison avec les traitements classiques est d’une grande importance dans les stratégies thérapeutiques du NB.

Souvent marginalisés par leurs pairs, les adolescents atteints de cancer voient non seulement leur intégrité physique et leur image corporelle menacées par la maladie, mais sont souvent atteints dans leur estime de soi. La Fondation sur la pointe des pieds organise des expéditions de groupe réunissant des adolescents atteints de cancer dont la condition physique leur permet d'entreprendre le périple, dont l’objectif est de favoriser l’amélioration de leur bien-être et leur estime de soi, mais également leurs habiletés sociales. Ce projet pilote vise à évaluer de façon qualitative et quantitative les effets de l’expédition thérapeutique sur l’ajustement psychosocial de 8 adolescents (3 filles, 5 garçons / 3 francophones, 5 anglophones) atteints de cancer ayant participé à une expédition. Des entrevues qualitatives ont été réalisées auprès des adolescents et de leurs parents et des questionnaires validés ont été administrés aux adolescents au cours des deux semaines avant et après l’expédition. Des analyses non paramétriques (Wilcoxon) révèlent une amélioration significative aux échelles d’Estime de soi de Rosenberg et d’attachement à la mère de l’Inventaire d’attachement aux parents et aux pairs de Greenberg & Armsden et une diminution à l’échelle de Conduite béhaviorale de Harter. Une analyse de contenu des entrevues qualitatives indique quatre thèmes positifs principaux : le plaisir, la connexion avec les autres, l’accomplissement et l’acquisition de compétences.

Le concept de "combi-ciblage" vise à concevoir des molécules programmées pour libérer au moins deux principes actifs aux modes d’action différents. Parmi ces molécules, appelées "combi-molécules", nous nous sommes plus particulièrement intéressés au couplage d’un inhibiteur de récepteur du facteur de croissance épidermique (ou EGFR) et d’un agent cytotoxique capable d’endommager l’ADN. Jusqu'à présent, cet agent cytotoxique a toujours consisté en des fonctions alkylantes. Récemment, nous avons élargi notre champ d’action et avons conçu des "combi-molécules" capable de se comporter non seulement comme des inhibiteurs de l'EGFR mais aussi comme des inhibiteurs de la synthèse de l'ADN. L'inhibition de la synthèse de l'ADN est assurée par le relargage d’analogues nucléosidiques. Au cours de cette présentation, la synthèse de ces nouvelles molécules ainsi que leur activité biologique sur plusieurs lignées cellulaires affectées par différents types de cancer seront abordées.

Le cancer épithélial de l’ovaire (CEO) est le cancer gynécologique le plus meurtrier en Amérique du Nord. Dans le but d’améliorer son traitement, les inhibiteurs de Poly Adénosine Diphosphate Ribose Polymérase (PARPi), comme l’Olaparib, sont actuellement en essai clinique de phase 2.Ils démontrent une bonne efficacité pour les patientes atteintes du cancer de l’ovaire et surtout pour celles mutées BRCA1/2. Cela s’explique par un effet de « létalité synthétique », dû à la mutation (BRCA1/2) qui joue un rôle central dans le système de réparation de l’ADN par Recombinaison Homologue (HR).La médecine personnalisée est de plus en plus prometteuse, d’où l’intérêt de rechercher un profil de patientes (biomarqueurs) atteintes du CEO muté ou pas pour BRCA1/2, répondant préférentiellement aux PARPi, que ce soit en tant qu’agent unique ou concomitant à la chimiothérapie.

Mon projet vise donc à analyser, l’expression de marqueurs spécifiques au système RH autre que BRCA1/2 dans des tumeurs de patients ainsi que des lignées cellulaires du CEO afin d’en établir une corrélation avec la réponse aux PARPi. Les premiers résultats montrent un taux d’expression génique et protéique variable pour les différentes cible du système par RH dans des lignées cellulaire du CEO. De plus, on montre une corrélation entre la sensiblité aux Carboplatine et celle aux PARPi. Ce projet et ces premiers résultats ont pour but d’améliorer une approche personnalisée de la médecine.

INTRODUCTION : En 2008, 1 300 diagnostics de cancer du col utérin (CCU) ont été réalisés au Canada et 380 femmes en sont décédées. La participation régulière au dépistage permet le traitement précoce et améliore le pronostic. Cependant, la participation n’est pas optimale et les déterminants expliquant la non-adhérence sont encore méconnus. Des études ont identifié certains facteurs personnels ou organisationnels pouvant expliquer la non-participation, mais ces recherches ont été réalisées auprès de populations spécifiques. OBJECTIF : Identifier les barrières et facilitateurs perçus par des femmes québécoises en regard du dépistage du CCU. MÉTHODOLOGIE : Étude exploratoire descriptive utilisant l’entretien de groupe comme outil de collecte de données. L’analyse des verbatim a été réalisée au moyen de l’analyse thématique selon un mode mixte. RÉSULTATS : 5 entretiens de groupe ont été réalisés auprès de femmes âgées entre 21 et 70 ans. 4 grandes catégories de déterminants à la participation ont émergé. Il semble donc que les éléments d’influence significatifs pour les femmes soient reliés à l’organisation des soins de santé, aux interactions interpersonnelles, aux connaissances et informations, ainsi qu’à la personne et ses proches. CONCLUSION : Dans sa pratique, l’infirmière devrait prendre en compte l’influence des caractéristiques personnelles et environnementales de l’individu, afin d’être en mesure d’intervenir adéquatement et de favoriser la participation au dépistage.

Le neuroblastome (NB) est une tumeur pédiatrique fréquente et agressive puisque 40% des patients rechutent et décèdent malgré une thérapie intensive. Bcl-2 est une des principales protéines anti-apoptotique. Elle est surexprimée dans le NB et pourrait expliquer cette résistance aux traitements. Notre objectif est de déterminer l’efficacité in vitro de l’Obatoclax (OB), un inhibiteur de Bcl-2, utilisé seul ou en combinaison avec le cisplatine dans le NB. Six lignées cellulaires de NB ont donc été traitées avec OB seul ou en association. La survie cellulaire a été mesurée par MTT. L’autophagie a été détectée par test MDC. Des Western Blots (WB) ont permis d’analyser l’importance des voies apoptotique et autophagique dans les cellules traitées. L’OB utilisé seul est très efficace sur nos lignées avec une IC50 moyenne de 0.12µM. De plus, lorsque OB est utilisé à 0.05µM en combinaison avec cisplatine, on multiplie par deux l’efficacité de ce traitement (IC50 : 4.11 à 2.7µM). De surcroît, nos WB démontrent l’augmentation de l’apoptose puisque PARP clivé (un marqueur précoce de l’apoptose) et Caspase-3 sont augmentés. L’OB augmente significativement l’autophagie détectée par MDC et par le clivage de LC3 II. En conclusion, l’OB utilisé seul ou en combinaison à des doses potentiellement thérapeutiques est très efficace dans le NB. Ces résultats permettent d’envisager une action clinique de cette molécule dans cette tumeur.

Selon l’Organisation Mondiale de la Santé, le cancer du sein constitue la principale forme de cancer chez la femme (OMS, 2004).En France, d’après les données nationales,50 000 femmes étaient touchées par le cancer du sein (Institut de Veille Sanitaire, 2005).Sur les 10 000 femmes traitées par mastectomie – ablation complète du sein – quatre femmes sur cinq refusent de recourir à une reconstruction chirurgicale du sein (Ricadat & Taïeb, 2008; Henry & al. 2010).On peut s’interroger sur les motifs qui sous-tendent le refus de recourir à une reconstruction mammaire à la suite d’une mastectomie. Ainsi, une étude qualitative, par entretien semi-directif auprès de cinq femmes ayant eu une ablation du sein à la suite d’un cancer et qui ont refusé la reconstruction, a été réalisée.Une analyse thématique de contenu a été effectuée (Paillé & Mucchielli, 2008) et a permis de faire émerger les thématiques suivantes: 1) le vécu traumatique, la question de la perte 2) la question du deuil 3) les mécanismes de défense 4) le rapport au corps et le rapport à la féminité.Ainsi, les résultats montrent, entre autre, que le cancer aurait une caractéristique traumatique, et que la perte du sein entraine une nécessité de faire un travail de deuil (Bacqué, 2005).Ces constatations viennent alors soutenir la nécessité de mettre en place des espaces de paroles pour que ces femmes puissent symboliser la perte vécue et choisir ou non par la suite de recourir à une reconstruction mammaire.

La fréquence des LMNH ganglionnaires ne cesse d’augmenter dans le monde. L’intérêt croissant porté à ces hémapothies malignes s’explique par les progrès des méthodes de diagnostic et par le bouleversement du pronostic grâce à l’introduction des thérapies ciblées.L’objectif principal de ce travail est d’évaluer les résultats thérapeutiques à l’orée de la disponibilité de l’anticorps monoclonal : Rituximab. Il s’agit d’une étude prospective de 70 malades pris en charge au service d’Hématologie du CHU d’Annaba de 2007 à 2009. Pour les 50 patients présentant un LMNH agressif, on retrouve un LMNH à grandes cellules de type B dans 82 % des cas. L’IPIaa est péjoratif chez 62 % des patients. Le protocole thérapeutique le plus utilisé est le R-CHOP. Les résultats du traitement sont 72 % de bonne réponse dont 52 % de réponse complète ; 24 % des patients sont décédés, un patient est en échec. Pour les lymphomes indolents (20), les LMNH à petites cellules représentent 65 % des cas, les lymphomes du Manteau 25 % et les lymphomes folliculaires 10 % des cas. Le RCHOP a été utilisé dans 35 % des cas. 70 % des patients sont en rémission complète.Les LMNH sont actuellement un cancer curable dans leur forme agressive. L’amélioration de nos résultats thérapeutiques nécessite un certain nombre de facteurs qui sont : un diagnostic plus précoce, une plus grande disponibilité du Rutiximab et une chimiothérapie plus agressive pour les LMNH à grandes cellules de mauvais pronostic.

Nombre de médicaments anticancéreux présentent une grande variabilité en terme de pharmacocinétique et de pharmacodynamique.
La grande majorité d'entre eux présente une fenêtre thérapeutique étroite, ce qui entraine un risque accru d'échec de la thérapie et/ou de toxicité, dans le cas d'un traitement uniforme pour tous les patients.

L'adaptation individuelle de la chimiothérapie - en maximisant l'efficacité de la thérapie et en minimisant les effets secondaires - est le principal défi des cliniciens pour le traitement en routine. Dans la plupart des cas, les marqueurs de substitution liés à la pharmacocinétique du médicament comme l'Aire Sous la Courbe (ASC) ou la concentration maximale (Cmax) sont les seuls critères quantitatifs utilisés pour l'adaptation de la dose.

Notre approche est axée sur la recherche du meilleur régime d'administration du médicament, c'est-à-dire celui pour lequel la probabilité que la concentration se trouve dans la fenêtre thérapeutique est maximale. Une première étape consiste à utiliser les modèles pharmacocinétiques de population disponibles dans la littérature pour évaluer les régimes standards (1, 2, 3 et 4 fois par jour) ou n'importe quel régime plus adapté.

Ainsi connaissant les paramètres pharmacocinétiques de population du médicament, nous pouvons définir quel est le meilleur régime d'administration tout en quantifiant le temps passé et la probabilité associée d'être à l'intérieur de la fenêtre thérapeutique.

Le but de ce projet est de comprendre les mécanismes régulateurs des centrosomes et des cils. Les centrosomes sont de petits organelles composés de 2 centrioles entourés par une matrice protéique. Ils fonctionnent comme le centre organisateur des microtubules et jouent un rôle crucial dans des processus divers comme la mitose ou la polarité. Les centrosomes promeuvent aussi la formation des cils pour les cellules quiescentes. Les centrosomes et des aberrations de cils sont impliqués dans diverses maladies humaines comme le cancer ou la polykystose rénale. Nous avons montré qu'une protéine déficiente dans diverses ciliopathies, Cep290, est essentielle pour la formation de cils. La caractérisation de protéines associées à Cep290 est importante pour comprendre son rôle dans la formation de cils et le développement de maladie. Plusieurs preuves suggèrent qu'une nouvelle protéine, NPHP5, ait des liens fonctionnels avec Cep290, bien qu'on ne connaisse pas la fonction précise de NPHP5. Notre hypothèse est que NPHP5 promeut la formation de cils avec Cep290 et que son dysfonctionnement contribue au développement de ciliopathies. Pour tester cela, nous analyserons la fonction de NPHP5, caractériserons sa relation avec Cep290 et étudierons son rôle dans les ciliopathies. Ces études amélioreront notre compréhension du rôle de Cep290 et NPHP5 dans la biologie des centrosomes/cils et peuvent mener au développement de nouvelles applications diagnostiques et thérapeutiques

En biologie, la transfection est une technique courante qui consiste à introduire de l’ADN exogène dans une cellule. Plusieurs techniques de transfection ont été développées et sont fonctionnelles, mais sont souvent cytotoxiques, peu efficaces et dépendent de la lignée cellulaire. Ainsi, malgré les avancées dans la thérapie génique, leurs applications cliniques chez l’humain sont malheureusement entravées.

Face à ces problématiques, nous proposons une nouvelle technique de transfection par laser amplifié des nanostructures plasmoniques. Grâce à la création du plasmon généré par des nanoparticules d’or irradiées par laser, il est possible de perforer temporairement la membrane cellulaire, ce qui permet l’introduction de l’ADN exogène. La première expérience de notre groupe (publiée dans Biomaterials) a été conduite sur des cellules de mélanome humain, en utilisant un laser femtoseconde. Notre technique est prouvée trois fois plus efficace que la méthode courante de lipofection, permet de traiter 40mm² de cellules par minute et est peu cytotoxique (<1%).

Notre affiche présentera les expériences subséquentes qui seront conduites sur d’autres types de cellules : le neurone et le macrophage, réputés pour être difficiles à transfecter. Les premiers essais ont démontré la faisabilité de notre technique. Des études plus approfondies sont en cours afin d’optimiser le procédé pour ces deux types de cellules, et de le comparer avec les méthodes courantes de transfection.

L’amplification du gène codant pour le récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (HER2) et/ou la surexpression du récepteur sont associées à un mauvais pronostic des carcinomes mammaires et sont prédictifs de la réponse au médicament ciblant ce récepteur (trastuzumab). L’évaluation fiable du statut de ce récepteur est donc essentielle. Actuellement, l’immunohistochimie (IHC) est utilisée comme technique de routine pour l’évaluation du statut HER2 et l’hybridation fluorescente in situ (FISH) est effectuée seulement pour les tumeurs qui sont équivoques à l’IHC. Cependant, certaines études ont rapporté que jusqu’à 12% des cas négatifs à l’IHC étaient FISH positifs. Dans une première étape, nous avons examiné dans 367 cas consécutifs de carcinome mammaire la concordance entre les résultats obtenus par IHC (score négatif (0, 1+) ou positif (3+)) et ceux obtenus avec le ratio HER2/CEP17 au FISH (négatif (< 2.0) ou positif (≥2.0)). La concordance observée entre les deux méthodes est de 99%. Deux cas négatifs à l’IHC parmi 206 étaient amplifiés (ratio de 3.3 et 2.2), tandis que tous les cas 3+ à l’IHC (n=31) étaient amplifiés. Pour les cas équivoques (2+), 87% n’étaient pas amplifiés et 13% étaient amplifiés. Nous avons observé une bonne concordance entre les deux méthodes, bien que deux cas aient changé de statut. Dans une prochaine étape, nous évaluerons l’utilité du FISH sur matrice tissulaire. Les cas discordants seront évalués par d’autres méthodes.

De nouvelles stratégies thérapeutiques sont essentielles pour élargir le spectre des chimiothérapies visant la rémission des patients atteints du cancer de la prostate (CaP) et diminuer les effets secondaires possibles. La combi-molécule ZR2003, est composée d’un coeur quinazoline qui serait spécifique au récepteur du facteur de croissance épidermal (EGFR/ErbB1) et d’une queue hémi-moutarde qui induit des dommages à l’ADN. Étant donné que la surexpression des récepteurs ErbB (ErbB1 à 4) est fréquente dans les tumeurs du CaP, nous avons émis l’hypothèse que le coeur de quinazoline de ZR2003 pourrait inhiber l’activité des récepteurs ErbB, potentialisant ainsi le signal apoptotique causé par les dommages à l’ADN induits par la queue hémi-moutarde. Ceci aurait comme résultat d’augmenter l’efficacité de ZR2003 tout en le rendant spécifique aux cellules surexprimant EGFR. Nous avons testé la molécule sur les lignées cellulaires 22Rv1 et DU145, représentant respectivement des stades précoces (hormono-sensible) ou avancés (hormono-réfractaire) du CaP, pour déterminer son potentiel cytotoxique. À 48 h de traitement avec ZR2003, nous avons observé une CI50 de l’activité métabolique de 2 µM pour les deux lignées. De plus, 38% des cellules DU145 et 65% des cellules 22Rv1 sont en apoptose précoce avec une dose de 10 µM de ZR2003. Nous concluons que ZR2003 est cytotoxique pour les cellules DU145 et 22Rv1, soit peu importe le statut de réponse aux hormones des cellules.

BRCA1 est un suppresseur de tumeur majeur dont les mutations augmentent les taux de cancers du sein et de l’ovaire. Malgré plusieurs investigations, peu est connu sur le mécanisme d’action de BRCA1 et cela met en évidence l’importance d’étudier ce dernier. BRCA1 participe à la réparation des bris double brins, cependant son mode d’action dans d’autres voies de réparation reste peu connu. Notre objectif consiste à investiguer la fonction de BRCA1 en présence de différents dommages à l’ADN. Diverses lignées cellulaires ont été traitées par des agents génotoxiques tels que l’irradiation gamma (induisant des bris double brins réparés entre autres par recombinaison homologue), les rayons ultraviolets (UV, induisant des dimères de pyrimidines réparés par le système d’excision de nucléotides) et le methylmethane sulfonate (MMS, induisant des alkylations de base réparées par le système d’excision de bases) dans le but d’étudier la stabilité et la localisation de BRCA1. Nous avons observé que contrairement au traitement par l’irradiation gamma, BRCA1 est dégradé par le protéasome après traitement par MMS ou UV. Nous concluons que BRCA1 est dégradé spécifiquement durant la réparation des dommages causés par MMS ou UV pour éviter des compétitions entre les diverses voies de réparation de l’ADN. Notre étude a permis une connaissance plus approfondie sur BRCA1 et sera utile pour le développement d’une stratégie de traitement contre le cancer du sein.

La surexpression des cytokines IL-6 et IL-8 est associée à la progression du cancer de la prostate (CaP) hormono-sensible (HS) vers une forme résistante à la castration (RC) de mauvais pronostic. Dans les lignées HS, l’expression cytoplasmique de la protéine kinase IKKepsilon (IKKε), impliquée dans l’inflammation chronique, est inductible par stimulation au tumor necrosis factor alpha (TNFα). En revanche, dans les cellules RC, IKKε est constitutivement exprimée au cytoplasme et au noyau. De plus, nous avons mis en évidence que l’expression nucléaire d’IKKε corrèle avec la sécrétion d’IL-6/IL8. Afin de décrire la régulation d’IKKε dans le CaP, nous nous sommes intéressés à son partenaire cytoplasmique, la kinase ubiquitaire TBK1. Nous émettons l’hypothèse que TBK1 séquestrerait IKKε au cytoplasme des cellules HS lors de son induction mais, au stade RC, la surexpression d’IKKε permettrait sa translocation nucléaire. Afin de valider notre hypothèse, nous avons généré des constructions lentivirales inductibles permettant l’inhibition de TBK1.Ces outils nous permettront d’étudier les effets de la sous-expression de TBK1 dans les lignées RC, ainsi que dans les lignées HS lorsque l’expression d’IKKε est induite. Les paramètres analysés seront la localisation cellulaire d’IKKε, par immunobuvardage, et la sécrétion d’IL-6/IL-8, par ELISA. Nous serons ainsi en mesure de définir le rôle de TBK1 et d’IKKε dans la progression du CaP et dans l’émergence du statut RC.

Les lymphomes T-NK type nasal représentent une forme rare mais agressive de proliférations lymphomateuses malignes.Nous rapportons à travers notre expérience de prise en charge de 7 patients, les caractéristiques cliniques, anatomo-pathologiques et évolutives de cette pathologie. Les dossiers médicaux de 7 patients (4 femmes et 3 hommes) suivis entre 2003 et 2009, ont été étudiés. L’âge moyen de nos patients est de 45,7 ans avec des extrêmes allant de 19 à 74 ans. Le tableau clinique associe des manifestations ORL à type de dysphonie, obstruction nasale, épistaxis, dysphagie, hypoacousie. Dans la majorité des cas la maladie est localisée ( IE, IIE ). L’IPI est inférieur ou égal à 2 dans tous les cas. L’étude anatomo-pathologique confirme la prolifération tumorale faite de grandes cellules positives avec le CD 45 et le CD 3. Le choix thérapeutique est dirigé d’emblée vers l’association Velbé-L Asparaginase-Dexamethasone, chez 4 patients avec une bonne réponse dans deux cas. Les patients traités initialement par CHOP ont rapidement rechuté. Au terme de notre étude, 5 patients sont vivants : 2 en remisssion complète après une ligne de chimiothérapie et 3 après deuxième et troisième ligne de chimiothérapie. Deux patients sont décédés. La survie moyenne est de 27 mois ( 2 - 69 ). Les lymphomes T-NK type nasal sont une forme rare mais grave de prolifération lymphomateuse. La présentation est le plus souvent localisée. Le protocole CHOP semble inefficace dans cette pathologie.

DDX10 est une ARN hélicase putative appartenant à la famille «DEAD-box». Les membres de cette famille possèdent neuf motifs conservés formant un cœur catalytique, flanqué par des extensions N- and C-terminales qui varient en taille et en composition d’acides aminés. Des mutations dans l’extension C-terminale de DDX10 ont été associées au cancer du sein. Nous avons testé plusieurs siRNA dirigés contre l’ARNm de DDX10 et nous avons étudié l’effet de la perte de DDX10 sur la maturation des ARN ribosomiques et sur la prolifération cellulaire. Nous avons observé une diminution de la production de l’ARNr 18S et une petite accumulation du pré-ARNr 45S. Nos expériences d’immunoprécipitation indiquent que DDX10 est associée au snoRNA U3 et à DRIM, une protéine spécifique à U3. Les courbes de croissance montrent une diminution de la prolifération cellulaire lorsque les cellules HeLa sont traitées avec des siRNA anti-DDX10. Lors de traitements prolongés, les cellules arrêtent de croître et entrent en apoptose. Nous étudions présentement les mutations de DDX10 associées au cancer du sein.